博士论文题目：无载体无选择标记转基因耐贮藏甜瓜（Cucumis melonL.）培育

摘要: 本文以甜瓜品种河套蜜瓜为实验材料，对果实成熟相关的四个基因进行了克隆和表达特性及无载体无选择标记反义RNA转化研究。主要结果如下:

1、利用RT-PCR方法从甜瓜品种河套蜜瓜成熟果实中克隆得到了ACS1、ACO1、ETR2以及HMGR基因，分析并阐明了这些基因在甜瓜授粉后不同发育时期的果实表达特性。

2、构建了无选择标记的ACS1和ACO1反义基因线性表达盒，利用花粉管通道法转化甜瓜，首次获得了无载体无选择标记的转基因耐贮藏甜瓜株系，与对照果实相比，T2代果实内源乙烯含量明显被抑制，其可溶性固形物没有变化，在室温下贮藏30天不软化腐烂，表现出果实成熟延缓的特性。既解决了甜瓜的贮藏保鲜问题，在一定程度上消除了人们对转基因作物的安全性顾虑，具有一定的创新性和应用价值。

攻读博士期间发表的相关论文：

1. Jin-Feng Hao, Yi-Ding Niu, Bao-Jun Yang, Feng Gao, Li-Quan Zhang, Jing Wang, Agula Hasi *. Transformation of a marker-free and vector-free antisense ACC oxidase gene cassette into melon via the pollen-tube pathway. Biotechnology Letters(影响因子1.636), DOI 10.1007/s10529-010-0398-2。

2. 郝金凤，李彤彤，郭艳琼，高峰，哈斯阿古拉. 甜瓜HMGR基因全长cDNA的克隆及序列分析. 生物技术通报，2010，8：106～106。

3. 郝金凤，高峰，博彦太，李凤，哈斯阿古拉. 甜瓜品种河套蜜瓜ACC氧化酶基因1（ACO1）全长cDNA的克隆及序列分析. 华北农学报，2010年，25(4)：61～63。

4. 郝金凤，哈斯阿古拉. 富含多糖的甜瓜果肉中提取总RNA方法的比较研究. 北方园艺，2010，5：15～17。

5. 郝金凤，财音青格乐，方天祺，哈斯阿古拉. 农杆菌介导的ACC氧化酶反义基因转化甜瓜的研究. tyc1286太阳成集团学报（自然科学版），2006，37（1）：54～57。

6. 郝金凤，哈斯阿古拉. 无选择标记转基因植物的研究进展. 北方园艺，2006，6：43～45。